Лабораторное исследование для определения генетической мутации гена СЕВРА. Наличие мутаций выступает в качестве значимого маркера острого миелоидного лейкоза.

Синонимы и связанные понятия

Detection of mutations in CEBPA genes in the diagnosis and treatment of myeloid leukemia

Зачем сдавать этот анализ?

1. Диагностика острого миелоидного лейкоза;
2. При выборе тактики лечения подтвержденного заболевания.

Подробное описание исследования

Источники Дополнительные замечания

В группу острых миелоидных лейкозов (ОМЛ) входят патологии, характеризующиеся нарушением дифференцировки и неконтролируемым ростом клеток миелоидной линии гемопоэза (кроветворения). 

Острый миелоидный лейкоз возникает из-за ряда приобретенных генетических мутаций. В результате чего нормальные элементы крови замещаются опухолевыми клетками.

Характерные клинические симптомы заболевания, как правило, появляются за несколько дней или недель до постановки диагноза. Наиболее распространенные проявления включают: утомляемость, бледность кожи, склонность к кровоизлияниям и кровотечениям, лихорадку, инфекционные осложнения. В редких случаях отмечаются поражения кожи.

На долю острых миелоидных лейкозов приходится 5% от всех злокачественных новообразований детского возраста и 20% от всех лейкозов.

Выделяют три основных группы ОМЛ: 

1. С повторяющимися генетическими аномалиями; 
2. Неспецифицированные; 
3. Другие варианты (обусловлены предшествующей миелодисплазией, ассоциированные с болезнью Дауна и пр.).

Внедрение методов цитогенетического и мутационного анализов с целью идентификации геномных и генных аномалий позволило выделить у пациентов с ОМЛ три группы риска: благоприятную, промежуточную и неблагоприятную. 

В промежуточную группу включены три молекулярных маркера острого миелоидного лейкоза: гены NPM1, CEBPA и FLT3.

Чаще всего острый миелоидный лейкоз развивается из-за наличия многоступенчатых трансформационных изменений (мутаций) в клетках-предшественницах гемопоэза. В результате таких трансформаций останавливается дифференцировка клеток крови и активируется неконтролируемый рост злокачественных аналогов миелоидных предшественников. 

Трансформационные изменения, диагностируемые при остром миелоидном лейкозе, могут быть различны: 

1. Изменения количества и структуры хромосом;
2. Непосредственно генетические мутации;
3. Нарушения в регуляции активности клеток.

Согласно современной модели лейкогенеза (процесса образования лейкоцитов), каждый случай развития патологии может быть вызван как минимум двумя вариантами генетических аберраций («поломок»). 

В первую группу входят мутации, которые вызывают активацию сигнальных путей и последующее значительное увеличение числа лейкозных клеток. Это мутации FLT3 (KIT), RAS, JAK2 и др. 

Во вторую группу включены мутации, которые, влияя на процессы транскрипции (процесс синтеза РНК с использованием ДНК) в клетках-предшественницах гемопоэза, приводят к остановке дифференциации гемопоэтических клеток.  

В результате мутаций второго класса возникают химерные гены, т.н. CBF-лейкоз. Также во вторую группу входят мутации генов СЕВРА (C/EBPα, семейства ССААТ/enhancer binding protein).

Ген CEBPА локализован в хромосоме 19q13.1 и кодирует две изоформы белка – рrotein30 и рrotein42. 

CCAAT/enhancer binding протеин α (C/EBPα) является фактором транскрипции (построения РНК) и играет важную роль в дифференцировке гранулоцитов. Снижение активности CEBPA вызывает трансформацию миелоидных клеток-предшественниц. Чаще всего диагностируют биаллельную мутацию гена CEBPA. 

Причиной нарушений функционирования гена CEBPΑ могут быть генетические трансформации самого гена или нарушение его экспрессии — высвобождения, — вызванное особенностями регуляции либо другими механизмами. 

Наличие мутаций CEBPА выступает благоприятным прогностическим признаком в терапии острого миелоидного лейкоза и позволяет использовать их в качестве молекулярной мишени. 

Сегодня мутации СЕВРА являются необходимым клиническим маркером, позволяющим предсказать и оценить эффективность терапии острого миелоидного лейкоза. 

Объектом исследования выступает ДНК, выделенная из мононуклеаров периферической крови и костного мозга.

Источники

1. Острые миелоидные лейкозы. Клинические рекомендации, 2020. — 95 с.
2. Стеганцева, М.В., Баровская, Ю.А., Кустанович, А.М. и др. Молекулярно-генетический анализ и прогностическое значение мутаций гена СЕВРА при остром миелоидном лейкозе у детей. Гематология. Трансфузиология. Восточная Европа, 2015. — № 1(01). — С. 50-61.
3. Pullikan, J., Tenen, D., Behre, G. C/EBPα deregulation as a paradigm for leukemogenesis. Leukemia, 2017. — Vol. 31(11). — P. 2279-2285. 

Дополнительные замечания

В результате указывают наличие или отсутствие мутации гена.

Подготовка к исследованию

1. Кровь сдают утром натощак — после последнего приема пищи должно пройти как минимум 8 часов. Вечером накануне поужинайте легкой нежирной пищей.
2. За 2 часа до сдачи крови на анализ нельзя курить, пить кофе и чай, а также фруктовые соки. Допустимо употребление небольшого количества негазированной воды — не сладкой, не соленой, не минеральной.
3. В течение 24 часов до анализа крови нельзя употреблять алкоголь. Также, по согласованию с лечащим врачом, необходимо отменить прием лекарственных препаратов.
4. За час до исследования избегайте психоэмоционального напряжения, физического напряжения, такого как быстрый подъем по лестнице, бег. Желательно прийти в отделение лаборатории заблаговременно и в течение 10-15 минут до сдачи крови спокойно посидеть.
5. Не сдавайте кровь сразу после физиотерапевтических процедур, массажа и инструментальных обследований, таких как УЗИ и рентген, в течение 5-7 дней.
6. Если вы контролируете лабораторные показатели в динамике, постарайтесь сдавать каждый анализ в одно и то же время при одинаковых условиях.

Противопоказания и ограничения

Абсолютных противопоказаний нет.

Интерпретация результата

Интерпретацию результатов исследования проводит специалист-генетик в комплексе с результатами других исследований. 

Референсные значения

Мутация не выявлена.